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生物分析中蛋白質、多肽及寡聚核苷酸樣品制備、除鹽耗材介紹

更新時間:2012-06-04      瀏覽次數:2304

 


 
LC-MS是蛋白質表征的強有力工具。反向HPLC/UPLC液相分離和質譜聯用技術是zui常用的分離模式,這種分離模式也是蛋白質除鹽的有效方法。生物制品及蛋白質溶液經常儲存在一定鹽離子濃度的緩沖溶液中,如PBS(磷酸鹽緩沖溶液)。這些鹽溶液,能和蛋白質形成加和離子,使數據解析更加復雜,同時,這些鹽類也抑制了ESI-MS分析時的離子化效率。因此,質譜分析之前,蛋白質的非揮發性鹽類的去除是重要的一步。沃特世公司的MassPREPTM 在線脫鹽小柱(2.1X10 mm,Part  number186004032)為客戶提供了簡單易行,快速(小于5分鐘的液相梯度,如圖1),及重現性高的有效脫鹽方法[1]。并成功應用于12KDa~150KDa分子量范圍的完整蛋白質的脫鹽LC-MS分析(如圖2)展示了這種除鹽柱用在細胞色素 C(分子量約12KDa),牛血清白蛋白BSA(分子量約62KDa),和IgG(分子量約150KDa)的除鹽效果,而且柱容量可高達10微克[2,3,4]。
 

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